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重组SUMO蛋白酶


Cat.No. RSP001

储存温度: -20

来源 重组SUMO酶,基因工程生产,大肠杆菌表达。

1. 产品简介

SUMO蛋白酶识别完整的含有100个氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)标签蛋白,并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比,由于其识别序列长,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于使用亲和层析的方法,去除SUMO蛋白酶,纯化目的蛋白。

2. 产品特性

中文别名(Chinese synonym

SUMO蛋白酶

英文别名(English synonym

SUMO Protease

来源(Source

大肠杆菌表达

标签(label

多聚His标签

纯度(Purity

SDS-PAGEHPLC分析,纯度> 90%

分子量(Molecular weight

26.55 kDa

缓冲液组分(Buffer

500 mM Tris-HCl, pH 8.02% Igepal (NP-40)1.5 M NaCl10 mM DTT

活力单位:30℃,SUMO Protease 1小时酶切2ug含有酶切位点的融合蛋白,酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位,即1U

3. 使用方法

3.1. 在EP管中配制如下反应体系(建议)

组分

体积

融合蛋白 

20 μg

10X SUMO Protease Buffer 

20 μL

ddH2O 

to 190 μL

SUMO Protease

10 μL

 

Total volume

200 μL

3.2. 30℃孵育,在0.5123小时分别吸出30 μL上述反应液,置于单独的EP管中。

3.3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。

3.4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取40 μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。

【注】如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于4℃,延长反应时间,并增加SUMO酶用量,以保证酶切效果。

 

1. 不同温度下SUMO蛋白酶切活性

反应时间(h

不同温度下剪切活性(%

4

16

25

30

0.5

48

73

83

88

1

60

87

90

93

2

71

94

94

95

3

74

95

95

95

 

4. 储存和运输稳定性

储存稳定性:长期储存于-80℃,或解冻后保存于-20℃使用。

5. 产品优势

无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。

质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。

纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。

符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。

质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。