重组SUMO酶
Cat.No. :RSP001
储存温度: -20℃
来源 : 重组SUMO酶,基因工程生产,大肠杆菌表达。
1. 产品简介
SUMO蛋白酶识别完整的含有100个氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)标签蛋白,并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比,由于其识别序列长,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于使用亲和层析的方法,去除SUMO蛋白酶,纯化目的蛋白。
2. 产品特性
中文别名(Chinese synonym) | SUMO蛋白酶 |
英文别名(English synonym) | SUMO Protease |
来源(Source) | 大肠杆菌表达 |
标签(label) | 多聚His标签 |
纯度(Purity) | 经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度> 90% |
分子量(Molecular weight) | 26.55 kDa |
缓冲液组分(Buffer) | 500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT |
活力单位:30℃,SUMO Protease 1小时酶切2ug含有酶切位点的融合蛋白,酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位,即1U。
3. 使用方法
3.1. 在EP管中配制如下反应体系(建议)
组分 | 体积 |
融合蛋白 | 20 μg |
10X SUMO Protease Buffer | 20 μL |
ddH2O | to 190 μL |
SUMO Protease | 10 μL
|
Total volume | 200 μL |
3.2. 30℃孵育,在0.5、1、2、3小时分别吸出30 μL上述反应液,置于单独的EP管中。
3.3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
3.4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取40 μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。
【注】如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于4℃,延长反应时间,并增加SUMO酶用量,以保证酶切效果。
表1. 不同温度下SUMO蛋白酶切活性
反应时间(h) | 不同温度下剪切活性(%) | |||
4℃ | 16℃ | 25℃ | 30℃ | |
0.5 | 48 | 73 | 83 | 88 |
1 | 60 | 87 | 90 | 93 |
2 | 71 | 94 | 94 | 95 |
3 | 74 | 95 | 95 | 95 |
4. 储存和运输稳定性
储存稳定性:长期储存于-80℃,或解冻后保存于-20℃使用。
5. 产品优势
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。
质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。
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